总甲状腺素（T4）酶联免疫检测试剂盒 T-4, total ELISA

检测原理

      通过竞争性免疫测定技术测量T4，将待定量的T4的血清或血浆样品与标记的T4和T4抗体混合.标记的T4含有8-苯胺基-1-萘磺酸（ANS）以抑制T4与血清蛋白的结合，否则会干扰测定。在孵育期间，固定量的标记T4与样品，标准品或质控对照血清中未标记的T4竞争固定数目的特异性T4抗体上的结合位点。未结合的T4与抗体结合的T4的分离以及随后测量的结合相的标记部分完成了测试。通过将未知样品的结果与从一系列T4校准品获得的样品进行比较，可以获得样品中T4浓度的精确测量。

     在T4 ELISA（EIA-1781）中，将T4的抗体包被在固相（微量滴定孔）上。加入测量量的患者血清和恒定量的用辣根过氧化物酶标记的T4。在孵育期间，患者样品中的T4和酶标记的T4竞争T4抗体上的有限结合位点。在室温下孵育60分钟后，用水洗涤固相以除去未结合的标记的T4。加入四甲基联苯胺（TMB）溶液并孵育20分钟，产生蓝色。通过加入1N HCl停止显色，并在450nm下用分光光度法测量所得黄色。形成的颜色的强度与存在的酶的量成比例，并且与患者样品中的T4的量成反比。通过参考标准曲线，确定未知样品中的T4浓度。